使用熒光顯微鏡要注意以下5點要求
更新時間:2020-07-22 點擊次數(shù):742
熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源,經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍光4200入)作為激發(fā)光、激發(fā)標本內的熒光物質發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。這樣在強烈的對襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認,敏感性高,主要用于細胞結構和功能以及化學成分等的研究。熒光顯微鏡的基本構造是由普通光學顯微鏡加上一些附件(如熒光光源、激發(fā)濾片、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎上組成的。
熒光顯微鏡使用方法:
1.打開燈源,超高壓汞燈要預熱幾分鐘才能達到亮點。
2.透射式熒光顯微鏡需在燈源與聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片,在物鏡的后面裝上相應的阻斷濾片。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的插塊。
3.用低倍鏡觀察,根據(jù)不同型號熒光顯微鏡的調節(jié)裝置,調整光源中心,使其位于整個照明光斑的中央。
4.放置標本片,調焦后即可觀察。使用中應注意:末裝濾光片不要用眼直接觀察,以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標本時,必須用無熒光的特殊油鏡;高壓汞燈關閉后不能立即重新打開,需經(jīng)5分鐘后才能再啟動,否則會不穩(wěn)定,影響汞燈壽命。
5.觀察在示教臺上的熒光顯微鏡下用藍紫光濾光片,可見經(jīng)o.01%的丫啶橙熒光染料染色的細胞,細胞核和細胞質被激發(fā)產(chǎn)生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色)。